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山羊ELISA试剂盒在使用上的一些要求
发布时间:2019-07-09   点击次数:99次
   山羊ELISA试剂盒在使用上的一些要求
  山羊ELISA试剂盒试验有些杂乱,并且需求留意的当地有许多,可是我们将之总体的归纳起来,会觉得重要的事项也就那么几条。做出准确的试验成果,您需留意这几条:
  需要在试验前1小时将山羊ELISA试剂盒从冰箱中取出,使各种试剂都康复到室温,以使结果更安稳。试验时,要使底物避光保存,用枪汲取液体时速度不能太快,以免产生气泡而使汲取量不准确,汲取液体时,要用量程和需要量接近的枪去吸,减少误差,要保证移液枪的准确性,误差不能超过百分之2。
  1.血清:室温血液天然凝结10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。保存过程中如呈现沉积,应再次离心。
  2.血浆:应根据山羊ELISA试剂盒的标本的要求挑选EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分),保存过程中如有沉积构成,应该再次离心。
  3.尿液:用无菌管搜集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。保存过程中如有沉积构成,应再次离心。
  4.细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管搜集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度到达100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞损坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。山羊ELISA试剂盒保存过程中如有沉积构成,应再次离心。
  5.安排标本:切开标本后,称取分量。用液氮迅速冷冻保存备用。标本消融后依然坚持2-8℃的温度。参加一定量的PBS,用手工或匀浆器将标本匀浆充沛。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。分装后一份待检测,其他冷冻备用。
  6.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行试验。若不能马上进行试验,可将山羊ELISA试剂盒标本放于-20℃保存,但应防止反复冻融。
  实验加样须注意如下问题:
  1、吸取样品时,加样枪吸头不应黏附多余的液体,加样时不可90度向孔中滴加液体,这样会导致液体残留在吸头上,加样不准确!
  2、不要将吸头伸入孔中,一方面若接触孔底可能压弯吸头,另一方面可能会将孔中的液体吹起来,加样不准确!
  3、正确的加样方法应为45度,吸头贴着孔壁加入,应注意:
  (1)角度太小,会使液体残留在孔壁上,导致山羊ELISA试剂盒加样不准确!
  (2)吸头应当贴着管壁和液面的交界处。

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